單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)測(cè)試盒

單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)測(cè)試盒

商品詳情：
測(cè)定意義：

MDHAR催化MDHA還原生成AsA，在抗壞血酸氧化還原代謝中具有重要作用。

測(cè)定原理：

MDHAR 催化 NADH 還原MDHA 生成 AsA和NAD+，NADH在340 nm有特征吸收峰，但是NAD+沒(méi)有。通過(guò)測(cè)定340 nm光吸收下降速率，來(lái)計(jì)算出MDHAR活性。

實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備：

研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍和雙蒸水
樣品中AA提取：

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來(lái)水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3.血清等液體：直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬(wàn)。

干擾suωELISA試劑盒 IFNω免費(fèi)代測(cè)試劑

干擾suκELISA試劑盒 IFNκ免費(fèi)代測(cè)試劑

干擾suεELISA試劑盒 IFNε免費(fèi)代測(cè)試劑

干擾suγ誘導(dǎo)蛋白30ELISA試劑盒 IFI30免費(fèi)代測(cè)試劑

干擾suγ誘導(dǎo)蛋白16ELISA試劑盒 IFI16免費(fèi)代測(cè)試劑

干擾suα8ELISA試劑盒 IFNα8免費(fèi)代測(cè)試劑

干擾suα7ELISA試劑盒 IFNα7免費(fèi)代測(cè)試劑

干擾suα6ELISA試劑盒 IFNα6免費(fèi)代測(cè)試劑

干擾suα5ELISA試劑盒 IFNα5免費(fèi)代測(cè)試劑

干擾suα4ELISA試劑盒 IFNα4免費(fèi)代測(cè)試劑

干擾suα21ELISA試劑盒 IFNα21免費(fèi)代測(cè)試劑

干擾suα2ELISA試劑盒 IFNα2免費(fèi)代測(cè)試劑

干擾suα17ELISA試劑盒 IFNα17免費(fèi)代測(cè)試劑

干擾suα16ELISA試劑盒 IFNα16免費(fèi)代測(cè)試劑

干擾suα14ELISA試劑盒 IFNα14免費(fèi)代測(cè)試劑
單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)測(cè)試盒土壤β葡萄糖苷酶(S-β-GC)/纖維二糖酶測(cè)試盒/分光光度法50管/24樣

土壤β葡萄糖苷酶(S-β-GC)/纖維二糖酶測(cè)試盒/微量法100管/48樣

土壤銨態(tài)氮測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

土壤銨態(tài)氮測(cè)試盒/微量法100T/96S

土壤(S-AL)測(cè)試盒/分光光度法50管/24樣

土壤(S-AL)測(cè)試盒/微量法100T/48S

土壤多酚氧化酶(S-PPO)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

土壤多酚氧化酶(S-PPO)測(cè)試盒/微量法100管/96樣

土壤芳基硫酯酶(S-ASF)測(cè)試盒/分光光度法50管/24樣
注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測(cè)定的吸光值過(guò)高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰，因此，570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。