甲基檸檬酸合酶(MCS)測(cè)試盒

商品詳情：
甲基檸檬酸合酶(MCS)測(cè)試盒測(cè)定意義：                          

MCS廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體基質(zhì)中，與檸檬酸合酶(CS)共同參與三羧酸循環(huán)的調(diào)節(jié)。

測(cè)定原理：

MCS催化丙酰CoA和草酰乙酸產(chǎn)生甲基檸檬酰，進(jìn)一步水解產(chǎn)生甲基檸檬酸；該反應(yīng)促使無色的DTNB轉(zhuǎn)變成黃色的TNB，在 412nm處有特征吸光值。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、無水乙醇和蒸餾水
樣品中AA提取：

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3.血清等液體：直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測(cè)定的吸光值過高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰，因此，570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。

紅細(xì)胞補(bǔ)體受體1ELISA試劑盒 CR1免費(fèi)代測(cè)試劑

亨廷頓關(guān)聯(lián)蛋白1ELISA試劑盒 HAP1免費(fèi)代測(cè)試劑

黑素轉(zhuǎn)鐵蛋白ELISA試劑盒 MFI2免費(fèi)代測(cè)試劑

黑素曲菌素ELISA試劑盒 MREG免費(fèi)代測(cè)試劑

黑素親和素ELISA試劑盒 MLPH免費(fèi)代測(cè)試劑

黑素皮質(zhì)激素5受體ELISA試劑盒 MC5R免費(fèi)代測(cè)試劑

黑素皮質(zhì)激素4受體ELISA試劑盒 MC4R免費(fèi)代測(cè)試劑

黑素皮質(zhì)激素3受體ELISA試劑盒 MC3R免費(fèi)代測(cè)試劑

黑素瘤缺乏因子2ELISA試劑盒 AIM2免費(fèi)代測(cè)試劑

黑素瘤缺乏因子1ELISA試劑盒 AIM1免費(fèi)代測(cè)試劑

黑色素瘤優(yōu)先表達(dá)抗原ELISA試劑盒 PRAME免費(fèi)代測(cè)試劑

黑色素瘤關(guān)聯(lián)硫軟骨素蛋白聚糖ELISA試劑盒 MCSP免費(fèi)代測(cè)試劑

黑色素瘤關(guān)聯(lián)ME20ELISA試劑盒 ME20M免費(fèi)代測(cè)試劑

黑色素聚集激素受體1ELISA試劑盒 MCHR1免費(fèi)代測(cè)試劑

黑色素AELISA試劑盒 MLANA免費(fèi)代測(cè)試劑
甲基檸檬酸合酶(MCS)測(cè)試盒葡萄糖6磷酶(G6P)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

葡萄糖6磷酶(G6P)測(cè)試盒/微量法100管/96樣

葡萄糖-6-磷脫氫酶(G-6-PD)測(cè)試盒/比色法100管/30樣

葡萄糖含量測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

葡萄糖含量測(cè)試盒/微量法100管/96樣

葡萄糖脫氫酶(GCDH)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

葡萄糖脫氫酶(GCDH)測(cè)試盒/微量法100管/96樣

葡萄糖氧化酶(GOD)測(cè)試盒/分光光度法50管/24樣

葡萄糖氧化酶(GOD)測(cè)試盒/微量法100管/48樣