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        ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠以 HRP標(biāo)記
        更新時間:2017-11-01   點(diǎn)擊次數(shù):1164次

        ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠以 HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物(HRP Streptavidin Conjugate,
        HRP-SA)為基礎(chǔ),可用于檢測血液,細(xì)胞、組織
        CD40抗原。該試劑盒
        、特異性強(qiáng)、定性定位    、背景清晰。在所用的 CD40一抗與相
        ,用生物化二抗與一抗特異性    ,zui后加   HRP-SA,形成抗
        應(yīng)靶抗原
        原—特異一抗—生物素化二抗—HRP-SA復(fù)合物,顯微鏡下觀察成像。 
        試劑盒所含試劑:
        試劑A 通透液:0.1% Triton-X 100   10 mL(選用) 
        試劑B 封閉
        試劑C (*分裝)已稀釋的即用型CD40一抗(2.5ml) 
        試劑D (*分裝)生物素化       IgG 1支 
        (濃度1.5 mg/mL,稀釋     1:300~1:500)50 μL+抗體稀釋液20ml 
        (封閉用) 20 mL 
        試劑E HRP-SA復(fù)合物1支(濃度1 μM,稀釋     1:50~1:200)100 μL 
        試劑F DAB顯色液 5ml 
        用戶自備試劑:
        1. 10mM TBS(pH7.2~7.4) 
        加蒸餾  800mL,濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4,zui后定容至1000mL 
        TBS-T:TBS+Tween 20(0.05%體積  ) 
        2.抗原修復(fù)液(依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液) 
        10mM pH6.0 檸檬酸
        檸檬酸0.38g 
        檸檬酸三鈉2.45g 
        加蒸餾  900mL,濃鹽酸調(diào)pH值至6.0,該試劑盒以 HRP標(biāo)記zui后定容至1000mL 
        或:0.5M EDTA修復(fù)液(pH8.0) 
        EDTA·2H2O 186.1g 
        加蒸餾  700mL,用10mM NaOH調(diào)pH值至8.0,zui后定容至1000Ml 
        3. 10 mL 
        4. Tween 20 5 mL 
        石蠟包埋組織切片
        實(shí)驗步驟(建議方案):
        石蠟包埋組織切片3~4μm 厚度 
        1.烤片: 將待做切片
        ,于60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr; 
        3次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
        2.脫蠟: 切片放10 min; 
        3.    : 切片經(jīng)下行酒精    ,無乙醇2 min;75%乙醇2min,自來5min,95%乙醇2次(每次2min),85%,ddH2O洗2×2min; 
        4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫
        度達(dá)到98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然    ,自來
        2min,TBS洗滌(2×2min)。 
        5.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育30 min; ,ddH2O洗2×
        1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)
        6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2 hr 或4℃過夜; 
        7.洗滌: TBS-T洗滌(3×5 min); 
        8.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育10 min; 
        9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑D),37℃濕盒中孵育30 min; 
        10.洗滌: TBS-T洗滌(3×5 min); 
        11.封閉: 滴加試劑Tween 20,37℃濕盒孵育封閉20 min; 
        12.加HRP-SA: 滴加用試劑C稀釋的試劑E(1:50~200,終濃度5~20 nM),37
        ℃濕盒中孵育30 min; 
        13.洗滌: TBS-T洗滌(3×5 min),該試劑盒以 HRP標(biāo)記TBS洗滌(2×5 min); 
        14.顯色:應(yīng)用DAB溶液(試劑F)顯色; 
        15.復(fù)染:自來,復(fù)染,脫  ,透明; 
        16.ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠封片: 待組織標(biāo)本干后,用試劑封片; 
        亞油酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品    112-63-0     5×50mg    Methyl Linoleate 
        亞油酯酰聚氧甘油酯標(biāo)準(zhǔn)品        100mg    Linoleoyl Polyoxylglycerides
        亞洲人參提取物粉標(biāo)準(zhǔn)品    50647-08-0     1.5g    Powdered Asian Ginseng Extract 
        煙酸標(biāo)準(zhǔn)品    59-67-6    200mg    Niacin
        煙酰胺標(biāo)準(zhǔn)品    98-92-0     500mg    Niacinamide (Vitamin B3)
        延胡索酸泰妙菌素標(biāo)準(zhǔn)品    55297-96-6     250mg    Tiamulin Fumarate 
        鹽酸阿的平標(biāo)準(zhǔn)品    6151-30-0     200mg    Quinacrine Hydrochloride 
        鹽酸阿法羅定標(biāo)準(zhǔn)品    561-78-4    250mg    Alphaprodine Hydrochloride CII
        鹽酸阿夫唑嗪標(biāo)準(zhǔn)品    81403-68-1    150mg    Alfuzosin Hydrochloride
        鹽酸阿可樂定標(biāo)準(zhǔn)品    73218-79-8    100mg    Apraclonidine Hydrochloride
        鹽酸阿米洛利標(biāo)準(zhǔn)品    17440-83-4    500mg    Amiloride Hydrochloride
        ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠

         

         

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