乳癌細胞培養基及培養基膠原酶的消化法實驗步驟

此法曾用于乳癌細胞的培養，具體程序是：

　?。?）先是用0.5%胰蛋白酶和0.02％EDTA（1：1）混合液漂洗培養基細胞一次，然后再換成新的混合液繼續消化，并在倒置顯微鏡下窺視和不時搖動培養瓶，到半數細胞脫落下來后，便立即停止消化；

　?。?）把消化液吸入離心管中，離心去上清，吸入另瓶中，加培養液置溫箱中培養；向原瓶內也補加新的培養基液繼續培養。用此法處理后，成纖維細胞比腫瘤細胞易先脫落。經過幾次反復處理，可能把成纖維細胞除凈。

本法是利用成纖維細胞對膠原酶較為敏感的特點，通過消化進行選擇。

　?。?）可用0.5mg/ml的膠原酶消化處理，邊消化邊在倒置顯微鏡下窺視，當發現成纖維細胞被除掉后，即終止消化；

　?。?）用Hanks洗滌處理一次后，更換新培養基液，繼續培養，可獲純凈腫瘤細胞。如成纖維細胞未被除凈，可再次重復。