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        制備骨髓細胞染色體標本的原理和步驟
        更新時間:2014-11-05   點擊次數:2237次

        制備骨髓細胞染色體標本的原理和步驟

        一、原理
        骨髓染色體標本制備通常用于白血病患者,特別是慢性或急性粒細胞性白血病,因為骨髓反映粒系統細胞增生情況,這些病人不宜用外周血。即使是淋巴細胞性白血病,也不主張用外周血,因為加PHA刺激外周血培養,只能獲得正常淋巴細胞分裂相,并不能反映那些病理淋巴細胞的染色體改變。

        骨髓細胞屬不斷增殖的細胞,培養可分短期培養和直接制片法,無論哪種其培養液中均不需加PHA

        二、骨髓染色體用品和試劑
        同外周血染色體制備。

        三、骨髓染色體操作步驟
        (一)短期培養法
        1.取材、培養:從髂骨取骨髓液0.2—0.5ml,無菌注入裝有5ml培養液的培養瓶中,37℃培養23—25小時后,加入秋水仙堿(終濃度為0.07μg/ml),繼續培養3—4小時,收獲。
        2.染色體制片:低滲、固定、制片及染色同實驗一。
        (二)直接制備法
        1.從髂骨抽取0.3—0.5ml,立即注入濃度為0.07μg/ml的秋水仙堿的生理鹽水5ml中,以吸管輕輕吸動,將骨髓中脂肪顆粒充分吸掉,1000rpm離心8分鐘,棄上清。
        2.加入同樣濃度的秋水仙堿生理鹽水2—3ml,室溫放置2—3小時,離心棄上清。
        3.染色體制片:低滲、固定、制片及染色同外周血染色體制備。

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