1.DNA/RNA提取：從樣本(如咽拭子、血液等)中提取病毒或目標生物的核酸(DNA或RNA)，這是后續擴增和檢測的基礎。
2.逆轉錄(針對RNA模板)：若檢測對象為RNA病毒(如新冠病毒)，需先通過逆轉錄酶將RNA轉化為互補DNA(cDNA)，以便進行PCR擴增。
3.PCR擴增
-變性：加熱使DNA雙鏈解離為單鏈(通常94℃左右)。
-退火：降溫使特異性引物與單鏈DNA結合(溫度根據引物設計而定)。
-延伸：在DNA聚合酶作用下，以引物為起點合成新DNA鏈(通常72℃左右)。
-通過多次循環(通常25-40次)，目標序列呈指數級擴增，微量核酸被放大至可檢測水平。
4.熒光信號檢測：試劑盒中預加入熒光標記的探針，該探針與擴增產物特異性結合后釋放熒光信號。實時熒光定量PCR儀通過監測熒光強度，繪制擴增曲線。若樣本含目標核酸，熒光信號隨擴增循環數增加而增強；若無則無信號。
核酸檢測PCR試劑盒的優點：
1.高靈敏度：可檢測極低濃度的核酸(如早期感染或無癥狀攜帶者)，降低漏檢率。
2.高特異性：引物和探針的設計基于目標基因的特殊序列，僅識別特定病原體，減少交叉反應風險。
3.快速高效：相比傳統病毒培養方法，PCR試劑盒能夠更快地得出檢測結果，大大縮短了診斷時間。
4.安全性高：試劑盒中的化學成分相對穩定且易于保存和運輸，降低了操作過程中的安全風險。同時，PCR反應在封閉管內進行，避免了污染和擴散的可能性。
5.重復性好：由于PCR技術的高保真性和試劑盒的穩定性，使得不同批次或同一批次內的實驗結果具有很好的一致性。
6.穩定性強：試劑盒組分經過優化配方和嚴格質控，確保在不同環境條件下均能穩定發揮作用，保證檢測結果的準確性。
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