判斷陰性對照是否污染，關鍵看它是否“干凈"——如果它長了菌或出現陽性信號，就說明實驗環境或操作有問題了。具體可以這樣排查：

一、先看結果

?無菌檢驗?：陰性對照應該無菌生長，一旦有菌落出現，立刻排查污染。

?PCR檢測?：陰性對照不該有DNA譜帶，有帶就說明體系被污染了。

二、排查污染源

?操作污染?：

檢查手套、吸頭是否混用，操作時是否規范。

用稀酸擦拭臺面，更換污染手套。

?試劑污染?：

試劑分裝保存，避免反復凍融。

用無菌水做空白對照，若長菌說明試劑有問題。

?環境問題?：

實驗臺、通風系統是否定期消毒。

操作區和產物分析區是否嚴格隔離。

三、優化操作

?分區操作?：標本處理、擴增、產物分析區分開。

?工具專用?：移液器、吸頭等不混用。

?嚴格消毒?：實驗臺、設備表面用含氯消毒液擦拭。

四、驗證結果

?陽性對照?：用已知陽性樣本驗證檢測能力。

?陰性對照?：用無菌水或空白基質做對照。

?同步培養?：和樣品同溫同時間培養，全程無菌落才算合格。